4◈★、目的基因的检测与鉴定◈★：分子检测与性状检测 ◈★、目的基因的检测与鉴定◈★： （1）受体生物染色体的 ）受体生物染色体的DNA是否插入了目的基因 是否插入了目的基因 方法◈★： 分子杂交技术（ 之间） 方法◈★：DNA分子杂交技术（DNA和DNA之间） 分子杂交技术 和 之间 2）目的基因是否转录出mRNA （2）目的基因是否转录出mRNA 方法◈★：分子杂交技术（ 之间） 方法◈★：分子杂交技术（DNA和mRNA之间） 和 之间 （3）目的基因是否翻译成蛋白质 ） 方法◈★：抗原—抗体杂交技术 抗原和抗体之间） 抗体杂交技术（ 方法◈★：抗原 抗体杂交技术（抗原和抗体之间） （4）个体水平鉴定◈★：包括抗虫◈★、抗病的接种实验尊龙凯时人生就是博z6com◈★， ）个体水平鉴定◈★：包括抗虫◈★、抗病的接种实验◈★， 以确定是否有抗性以及抗性程度

　　3尊龙凯时人生就是博z6com◈★、将目的基因导入受体细胞——转化 ◈★、将目的基因导入受体细胞 转化 导入植物细胞◈★：农杆菌转化法◈★、 ①导入植物细胞◈★：农杆菌转化法◈★、基因枪 法和花粉管通道法等◈★； 导入动物细胞◈★： 法和花粉管通道法等◈★；②导入动物细胞◈★： 显微注射技术◈★， 显微注射技术◈★，即采用显微注射仪将目的 基因注入受精卵◈★； 导入微生物细胞◈★： 基因注入受精卵◈★；③导入微生物细胞◈★：转 化法狼群影院免费观看◈★。早期用原核生物作为受体细胞◈★，以 化法◈★。早期用原核生物作为受体细胞◈★， 大肠杆菌应用最广◈★。 大肠杆菌应用最广◈★。一般是将细菌用氯化 钙处理制成感受态细胞◈★， 钙处理制成感受态细胞◈★，再与重组表达载 体DNA分子混合尊龙凯时人生就是博z6com◈★，在一定温度下完成转化 分子混合◈★， 分子混合 标记基因表达性状代表导入成功◈★。 过程◈★。 （标记基因表达性状代表导入成功◈★。）

　　一◈★、基因工程概念◈★：P5 基因工程概念◈★： 基因工程的工具◈★： 二◈★、基因工程的工具◈★： 1◈★、限制性内切酶 狼群影院免费观看◈★、 2◈★、DNA连接酶 ◈★、 连接酶 3◈★、运载体 ◈★、 三◈★、基因工程的一般程序

　　1◈★、限制性内切酶 ◈★、 能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷 能够识别双链 分子的某种特定的核苷 酸序列◈★， 酸序列◈★，并使每条链中特定部位的两个核 苷酸之间的磷酸二酯键断开◈★， 苷酸之间的磷酸二酯键断开◈★，形成黏性末 端或平末端

　　2◈★、重组载体的构建（基因工程的核心） ◈★、重组载体的构建（基因工程的核心） • 一个基因表达载体的组成◈★：目的基因◈★、 一个基因表达载体的组成◈★：目的基因◈★、 启动子狼群影院免费观看◈★、终止子和标记基因等◈★。 启动子◈★、终止子和标记基因等◈★。 • 在体外进行 • 用同一种限制性内切酶切割载体 • 通过 通过DNA连接酶连接目的基因和载体 连接酶连接目的基因和载体

　　2◈★、DNA连接酶 ◈★、 连接酶 将双链DNA片段“缝合”起来◈★，恢复被限 片段“ 将双链 片段 缝合”起来◈★， 制酶断开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键

　　3狼群影院免费观看◈★、运载体 ◈★、 • 作为运载体必须具备四个条件◈★：①能在宿 作为运载体必须具备四个条件◈★： 主细胞中保存下来并大量复制◈★； 主细胞中保存下来并大量复制◈★；②有一个 至多个限制酶切位点◈★； 至多个限制酶切位点◈★；③有一定的标记基 便于进行筛选◈★。 因◈★，便于进行筛选◈★。如大肠杆菌割质粒携 带的氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基 就可以作为筛选的标记基因◈★。 因◈★，就可以作为筛选的标记基因◈★。④载体 应对受体细胞无害◈★。 应对受体细胞无害◈★。 • 常用的运载体主要有质粒（双链环状 常用的运载体主要有质粒（双链环状DNA 分子）◈★、噬菌体或某些病毒◈★。 ）◈★、噬菌体或某些病毒 分子）狼群影院免费观看◈★、噬菌体或某些病毒◈★。

　　• • • • 1◈★、目的基因的获取 尊龙凯时人生就是博z6com◈★、 ①从基因文库中获取 利用PCR（多聚酶链式反应）技术扩增目的基因 ②利用 （多聚酶链式反应） 目的——获取大量的目的基因◈★；原理 获取大量的目的基因◈★； 双链DNA的 目的 获取大量的目的基因 原理——双链 双链 的 复制◈★；条件——需要 需要DNA模板◈★、引物◈★、四种脱氧核苷 模板◈★、 复制◈★；条件 需要 模板 引物◈★、 耐高温的DNA聚合酶和酶促反应所需的离子◈★，同 聚合酶和酶促反应所需的离子◈★， 酸◈★、耐高温的 聚合酶和酶促反应所需的离子 时还要控制温度◈★；过程——高温变性◈★、低温复性和中温 高温变性◈★、 时还要控制温度◈★；过程 高温变性 延伸狼群影院免费观看◈★。 延伸◈★。 人工合成◈★：如果基因比较小◈★、核苷酸序列已知◈★， ③人工合成◈★：如果基因比较小◈★、核苷酸序列已知狼群影院免费观看◈★，可以 通过DNA合成仪用化学方法直接合成尊龙凯时人生就是博z6com◈★。 合成仪用化学方法直接合成◈★。 通过 合成仪用化学方法直接合成z6尊龙凯时官方网站◈★，尊龙凯时人生就是博官方网站◈★，尊龙凯时·(中国)人生就是搏!◈★！尊龙ag旗舰厅◈★，尊龙凯时登录尊龙登录入口◈★，